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描述:測定意義:GSH/GSSG是細(xì)胞內(nèi)重要的氧化還原對之一。因此,測定細(xì)胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細(xì)胞所處的氧化還原狀態(tài),也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的主要指標(biāo)之一。測定原理:利用2-VP法測GSSG含量。氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒
標(biāo)題:氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計/、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1支,4℃保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃保存。臨用前加入5mL蒸餾水溶解,4℃保存。
試劑五:液體×1瓶,-20℃保存。臨用前加入0.2mL蒸餾水稀釋,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)液:液體×1瓶,1μmol/mL GSSG,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加1 mL試劑一,冰上充分研磨,8000rpm 4℃離心10min,取上清液(如上清不清澈,再離心3min)100μL,加900μL的蒸餾水混勻待測。
GSSG含量測定:
1. 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到412nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三置于25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動物)水浴中保溫30min。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取0.5mL EP管,加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液,1μL試劑二,蓋緊后混勻,置于37℃水浴30min;開蓋后依次加入140μL試劑三,40μL試劑四,2μL試劑五,迅速混勻后,測定30s和150s光吸收A1和A2。
4. 測定管:取0.5mL EP管,加入20μ上清液,1μL試劑二,蓋緊后混勻,置于37℃水浴30min;開蓋后依次加入140μL試劑三,40μL試劑四,2μL試劑五,迅速混勻后,測定30s和150s光吸收A3和A4。
注意事項:
因為提取過程中去掉蛋白質(zhì),所以提取液不能用于測定蛋白含量。
氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量檢測試劑盒
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