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描述:測定意義S-NR催化土壤中硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,是土壤硝態(tài)氮還原的關(guān)鍵酶。研究S-NR的活性對合理施肥,降低氮素的損失具有重要意義。土壤硝酸還原酶(S-NR)檢測試劑盒
標(biāo)題:土壤硝酸還原酶(S-NR)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
土壤硝酸還原酶(S-NR)檢測試劑盒
測定原理
S-NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;產(chǎn)生的亞硝酸鹽能夠在酸性條件下,與對–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成紅色偶氮化合物;生成的紅色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰,可用分光光度法測定。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
試劑一:液體20mL×1瓶,-20℃保存。
試劑二:液體10mL×1瓶,-20℃保存。
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:標(biāo)準品儲備液1mL,-20℃保存。
0.1mmol/L的NaNO2標(biāo)準液的配制:用時將試劑五稀釋100倍,即取 0.1ml 加蒸餾水定容至 10ml。
測定操作表
試劑名稱 | 1mL帶蓋離心管 | |||
測定管 | 對照管 | 標(biāo)準管 | 空白管 | |
風(fēng)干土樣(g) | 0.1 | 0.1 |
|
|
0.1mmol/LNaNO2(μL) |
|
| 100 |
|
雙蒸水(μL) |
| 500 |
| 100 |
試劑一(μL) | 375 |
| 375 | 375 |
試劑二(μL) | 125 |
| 125 | 125 |
混勻后,蓋蓋后37℃水浴60min,8000g室溫離心10min,取上清液
上清液(μL) | 400 | 400 | 400 | 400 |
試劑三(μL) | 250 | 250 | 250 | 250 |
試劑四(μL) | 250 | 250 | 250 | 250 |
混勻,顯色20min后,4000g,室溫離心10min,用蒸餾水調(diào)零,540nm下讀取各管吸光值
注意事項
1、試劑一、試劑二和試劑五在冰上放置,用完立即放回-20℃。
2、標(biāo)準管和空白管只需測一次。每個測定管設(shè)一個對照管。
土壤硝酸還原酶(S-NR)檢測試劑盒
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